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Radio Column Chromatographic Assay of H{sup 3}-Labelled Substances; Analyse par radiochromatographie en colonne, de substances marquees par le tritium; Radiokhromatograficheskoe ispytanie mechennykh tritiem veshchestv na kolonke; Analisis por radiocromatografia en columna de sustancias marcadas con {sup 3}H

Abstract

Combined radio-chromatographic investigations of H{sup 3}-labelled substances are an integral part of the majority of biochemical experiments with H{sup 3}-labelled compounds. H{sup 3}-radio paper chromatography yields, in a scanner with a windowless flow counter, a counting efficiency of 0,5 -1,5%, depending largely on the thickness of the paper and the self-absorption of the labelled compound. The radio gas chromatography of tritiated compounds presents no major problem. Successful use is being made of a combination of a gas chromatograph with a flow ionization chamber and vibrating reed electrometer, a system originated by K. E. Wilzbach and P. Riessz, and improved by H. Dutton, L. Mason and L. Blair. Through the use of ''Teflon'' and silicone-rubber for the insulating parts of the flow ion chamber, it can be operated at close to 300{sup o}C. Radio column chromatography with tritium holds little promise, when the column effluent is spread out as a shallow layer and slowly passes under a windowless flow counter or a scintillation counter, as was successfully tried with C{sup 14}. Liquid scintillation spectrometry is likely to be the chosen method. Essentially, there are two different approaches feasible. These have been compared: 1. The column effluent is passed through a coil  More>>
Authors:
Scharpenseel, H W; Menke, K H [1] 
  1. Institute of Soil Science and Institute of Animal Husbandry, Bonn University, Bonn (Germany)
Publication Date:
Jan 15, 1962
Product Type:
Conference
Resource Relation:
Conference: Symposium on Tritium in the Physical and Biological Sciences, Vienna (Austria), 3-10 May 1961; Other Information: 16 figs.,2 tabs., 29 refs.; Related Information: In: Tritium in the Physical and Biological Sciences. V. 1. Proceedings of a Symposium| 380 p.
Subject:
37 INORGANIC, ORGANIC, PHYSICAL AND ANALYTICAL CHEMISTRY; CARBON 14; EFFICIENCY; FLOW COUNTERS; GAS CHROMATOGRAPHY; PLEXIGLAS; SCINTILLATION COUNTERS; SILICONES; TEFLON
OSTI ID:
22028524
Research Organizations:
International Atomic Energy Agency, Vienna (Austria)
Country of Origin:
IAEA
Language:
English
Other Identifying Numbers:
Other: ISSN 0074-1884; TRN: XA12R0276116790
Submitting Site:
INIS
Size:
page(s) 281-302
Announcement Date:
Jan 18, 2013

Citation Formats

Scharpenseel, H W, and Menke, K H. Radio Column Chromatographic Assay of H{sup 3}-Labelled Substances; Analyse par radiochromatographie en colonne, de substances marquees par le tritium; Radiokhromatograficheskoe ispytanie mechennykh tritiem veshchestv na kolonke; Analisis por radiocromatografia en columna de sustancias marcadas con {sup 3}H. IAEA: N. p., 1962. Web.
Scharpenseel, H W, & Menke, K H. Radio Column Chromatographic Assay of H{sup 3}-Labelled Substances; Analyse par radiochromatographie en colonne, de substances marquees par le tritium; Radiokhromatograficheskoe ispytanie mechennykh tritiem veshchestv na kolonke; Analisis por radiocromatografia en columna de sustancias marcadas con {sup 3}H. IAEA.
Scharpenseel, H W, and Menke, K H. 1962. "Radio Column Chromatographic Assay of H{sup 3}-Labelled Substances; Analyse par radiochromatographie en colonne, de substances marquees par le tritium; Radiokhromatograficheskoe ispytanie mechennykh tritiem veshchestv na kolonke; Analisis por radiocromatografia en columna de sustancias marcadas con {sup 3}H." IAEA.
@misc{etde_22028524,
title = {Radio Column Chromatographic Assay of H{sup 3}-Labelled Substances; Analyse par radiochromatographie en colonne, de substances marquees par le tritium; Radiokhromatograficheskoe ispytanie mechennykh tritiem veshchestv na kolonke; Analisis por radiocromatografia en columna de sustancias marcadas con {sup 3}H}
author = {Scharpenseel, H W, and Menke, K H}
abstractNote = {Combined radio-chromatographic investigations of H{sup 3}-labelled substances are an integral part of the majority of biochemical experiments with H{sup 3}-labelled compounds. H{sup 3}-radio paper chromatography yields, in a scanner with a windowless flow counter, a counting efficiency of 0,5 -1,5%, depending largely on the thickness of the paper and the self-absorption of the labelled compound. The radio gas chromatography of tritiated compounds presents no major problem. Successful use is being made of a combination of a gas chromatograph with a flow ionization chamber and vibrating reed electrometer, a system originated by K. E. Wilzbach and P. Riessz, and improved by H. Dutton, L. Mason and L. Blair. Through the use of ''Teflon'' and silicone-rubber for the insulating parts of the flow ion chamber, it can be operated at close to 300{sup o}C. Radio column chromatography with tritium holds little promise, when the column effluent is spread out as a shallow layer and slowly passes under a windowless flow counter or a scintillation counter, as was successfully tried with C{sup 14}. Liquid scintillation spectrometry is likely to be the chosen method. Essentially, there are two different approaches feasible. These have been compared: 1. The column effluent is passed through a coil of plastic scintillator tubing, which is wound around a ''Plexiglas'' cylinder and placed in a bath of silicone oil in a light pipe with TiO{sub 2}-reflector. Similarly, the HP-containing effluent can be directed through a test vial, filled - very much as in Steinberg's method - with plastic scintillator beads. These two approaches, that operate highly satisfactorily in the case of C{sup 14}, offer low counting efficiencies of less than 1% for H{sup 3} due to the unfavourable surface to volume ratio. 2. The column effluent is combined 1:30 with a mixture of 3:2 toluene/ethanol by the action of a magnet-vibrator before being assayed while passing through a K{sup 40}-free glass - coiled between the analyser- and monitor-phototubes. In order to ensure a laminar flow and constantly mixed volume ratio, dose-pumps are lised for the supply of buffer on the column and of the 30-fold volume of toluene/ethanol. The counting efficiency for H{sup 3} averages 2.5-4% for'coils spreading over the whole diameter of the phototubes. 3. The aqeous column effluent is led through an anthracene-filled glass tube and the H{sup 3} counted with close to l{sup o}/o efficiency. (author) [French] Dans la majorite des cas, les recherches radiochromatographique s combinees portant sur des substances marquees par {sup 3}H font partie integrante des experiences biochimiques utilisant des composes trities. Avec un ensemble comprenant un compteur a balayage continu sans fenetre, le comptage du tritium par radiochromatographi e sur papier est d'un rendement de 0,5 a 1,5%, qui depend dans une large mesure de l'epaisseur du papier et de l'autoabsorption dans le compose marque. La radiochromatographie en phase gazeuse des composes trities ne presente pas davantage de difficultes serieuses. On utilise avec succes un ensemble de chromatographic en phase gazeuse comportant une chambre d'ionisation a courant et un electrometre a lame vibrante - concu par K. E. Wilzbach et P. Riesz et perfectionne par H. Dutton, L. Mason et L. Blair. Grace a l'emploi de ''Teflon'' et de caoutchouc de silicones pour les elements isolants de la chambre d'ionisation, cet ensemble peut fonctionner a des temperatures voisines de 300{sup o}C. Avec le tritium, la radiochromatographi e en colonne donne des resultats mediocres, si le liquide sortant de la colonne se repand en une couche mince et passe lentement sous un compteur a balayage continu sans fenetre ou un compteur a scintillations, alors que le meme procede a donne d'excellente resultats avec le carbone-14. Aussi est-il probable que l'on adoptera la spectrometrie a scintillations en phase liquide. Elle comporte essentiellement deux procedes differents, que les auteurs ont compares: 1. Le liquide sortant de la colonne passe a travers un tube scintillateur en matiere plastique, enroule en spirale autour d'un cylindre en ''Plexiglas'' et place dans un bain d'huile de silicone, dans un guide de lumiere avec reflecteurs en TiO{sub 2}. Ou encore, le liquide tritie sortant de la colonne passe par un flacon rempli d'un scintillateur en matiere plastique sous forme de perles, comme dans la methode de Steinberg. Ces deux variantes, qui donnent des resultats tres satisfaisants pour le carbone-14, ont un rendement de comptage inferieur a 1% pour le tritium, par suite du rapport defavorable entre la surface et le volume. 2. Avant d'etre analyse, le liquide sortant de la colonne est melange, dans la proportion de 1 a 30, avec du toluene/ethanol 3:2 au moyen d'un agitateur magnetique; ensuite, on fait passer ce melange dans un serpentin en verre exempt de potassium-40, entre le phototube d'analyse et celui de controle. Afin d'assurer un ecoulement laminaire et un rapport constant de volume entre les substances melangees, des pompes de dosage sont utilisees pour ajouter une substance-tampon a la colonne et pour maintenir le rapport 1:30 du melange en volume. Le rendement de comptage de {sup 3}H est de 2,5 a 4% en moyenne, lorsque la spirale couvre tout le diametre du phototube. 3. Le liquide aqueux sortant de la colonne passe par un tube en verre rempli d'anthracene, et le tritium est compte a 1% pres. (author) [Spanish] En la mayoria de los casos, las determinaciones radiocromatograficas combinadas de compuestos tritiados forman parte integrante de los experimentos bioquimicos con compuestos marcados con {sup 3}H. Al emplear aparatos de exploracion con contadores de flujo sin ventana, la radiocromatografi a sobre papel de los compuestos tritiados da rendimientos de recuento del 0,5 al 1,5%, segun el espesor del papel y la autoabsorcion en el compuesto marcado. La radiocromatografi a en fase gaseosa de dichos compuestos tampoco presenta problemas serios. Se emplea con exito la cromatografia en fase gaseosa, combinada con la aplicacion de una camara de ionizacion de flujo y un electrometro de lengueeta vibratoria. Se trata de un sistema ideado por K. E. Wilzbach y P. Riessz, y mejorado por H. Dutton, L. Mason y L. Blair, que puede utilizarse a temperaturas hasta de 300{sup o}C si se emplean ''Teflon'' y siliconas para las partes aislantes de la camara de ionizacion. La radiocromatografi a en columna de los compuestos tritiados no ofrece perspectivas favorables si se emplea el metodo, tan eficaz en el caso del {sup 14}C, que consiste en extender el efluente en una capa de poco espesor que se hace pasar lentamente por debajo de un contador de flujo sin ventana o de un contador de centelleo. Probablemente se terminara por adoptar como metodo de trabajo la espectrometria de centelleo del liquido. Fundamentalment e existen dos manetas de operar, que el autor ha comparado: 1. El efluente de la columna se hace circular por un tubo de material plastico centelleador arrollado en espiral alrededor de un cilindro de ''Plexiglas'' que se coloca en un bano de aceite de silicona contenido en una guia optica con reflector de Ti0{sub 2}. Tambien se puede hacer pasar el efluente conteniendo tritio por un frasco relleno con cuentas de un centelleador de material plastico, como en el metodo de Steinberg. Las dos variantes dan excelentes resultados en el caso del {sup 14}C, pero en el del {sup 3}H el rendimiento de recuento es inferior al 1% debido a que la razon superficie/volumen es desfavorable. 2. Por medio de un agitador magnetico se mezcla el efluente de la columna en la proporcion 1:30 con tolueno/etanol 3:2; seguidamente se analiza esta mezcla haciendola circular por un serpetin de vidrio, exento de {sup 40}K, situada entre el fototubo analizador y el de control. La solucion tampon se anade por medio de bombas dosificadoras, igual que el volumen necesario de la mezcla tolueno/ etanol, y con ello se aseguran un flujo laminar y una proporcion constante en la mezcla final. El rendimiento de recuento del {sup 3}H cuando el serpentin abarca todo el diametro de los fototubos oscila en general entre 2,5 y 4%. 3. El efluente acuoso de la columna se hace pasar por un tubo de vidrio relleno de antraceno y el recuento del {sup 3}H se efectua con un rendimiento del orden del 1 por ciento. (author) [Russian] Kombinirovannye radiokhromatograficheskie issledovaniya mechennykh tritiem veshchestv yavlyayutsya neot{sup e}mlemoj chast'yu bolytsinstva biokhimicheskikh ehksperimentov, provodimykh s mechennymi tritiem soedineniyami. Vykhod H{sup 3}-radiokhromatogrammy na bumage v razvertyvayushchem ustrojstve s potochnym schetchikom bez okoshka s ehffektivnost'yu otscheta v 0,5-1,5% v znachitel'noj stepeni zavisit ot tolshchiny bumagi i samopogloshcheniya mechenogo soedineniya. Ne predstavlyaet takzhe bol'shikh problem gazovaya radiokhromatografiya. Uspeshno primenyaetsya kombinatsiya gazovoj khromatogrammy s potochnoj ionizatsionnoj kameroj i ehlektrometrom s vibriruyushchim yazychkomsistema, razrabotannaya K. EH. VIL'TSBAKHOM i P. RISS i usovershestvovannaya G. DATTONOM, L. MASONOM i L. BLEORM, kotoraya pri ispol'zovanii teflona (Teflon) i kreministoj reziny dlya insolyatsionnykh (insolating) chastej potochnoj ionnoj kamery mozhet funktsionirovat ' pri temperature blizkoj k 300{sup o}C. Radiokhromatografiya na kolonke s tritiem yavlyaetsya maloobeshchayushchej, kogda ehflyuent kolonki razbrasyvaetsya melkim sloem i medlenno prokhodit pod potochnym schetchikom bez okoshka ili pod stsintillyatsionnym schetchikom, kak ehto uspeshno bylo provedeno s C{sup 14}. Spektrometriya zhidkostnoj stsintillyatsii yavlyaetsya udachnym metodom dlya vybora. Po sushchestvu imeetsya dva razlichnykh podkhoda, sravnenie kotorykh privoditsya nizhe: 1. EHflyuent kolonki prokhodit cherez obmotku truboprovoda plastikovogo stsintillyatora. Truboprovod namatyvaetsya na tsilindr iz pleksiglasa i ustanavlivaetsya v vannochku s kreministym maslom v svetovoj trube s reflektorom TiO{sub 2}. Podobnym obrazom ehflyuent s soderzhaniem H{sup 3} mozhno napravit' cherez issleduemuyu ampulu, napolnennuyu - podobno tomu kak ehto delaetsya po metodu SHTEJNBERGA, - plastikovymi sharikami stsintillyatora. EHti dva podkhoda, okazavshiesya vpolne udovletvoritel'nymi v sluchae s C{sup 14}, imeyut nizkuyu ehffektivnost' scheta dlya tritiya, t.e. menee 1%, iz-za neblagopriyatnoj poverkhnosti v otnoshenii ob{sup e}mnogo sootnosheniya. 2. EHflyuent kolonki ob{sup e}dinyaetsya pri sootnoshenii 1:30 so smes'yu toluol/ehtanol v sootnoshenii 3:2 pri pomoshchi magnitnogo vibratora eshche do ispytaniya, t.e. vo vremya prokhozhdeniya cherez steklyannyj sosud iz K{sup 40} mezhdu fototrubkami analizatora i monitora. Dlya obespecheniya laminarnogo potoka i postoyanno smeshannogo : ob{sup e}mnogo sootnosheniya primenyayutsya dozirovochnye nassoy po sozdaniyu na kolonke amortizatora i 30-fold ob{sup e}ma toluola/ehtanola . EHffektiv- noet' scheta tritiya kolebletsya v srednem ot 2,5 do 4% dlya katushek, rasprostranyayushchikhsya po vsemu diametru fototrubok. 3. EHflyuent vodyanoj kolonkhi propuskhaetsya cherez napolnennyj antratsenom stekhlyannyj sosud, i podschet H{sup 3} proizvoditsv s tochnost'yu, bliskhoj 1%. (author)}
place = {IAEA}
year = {1962}
month = {Jan}
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