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Transformation de levures en utilisant le LiOAc et le DMSO But : Permabiliser les levures pour pouvoir incorporer dans celles-ci les
 

Summary: 1
Transformation de levures en utilisant le LiOAc et le DMSO
But : Perméabiliser les levures pour pouvoir incorporer dans celles-ci les
vecteurs plasmidiques que l'on veut exprimer.
Matériel :
- DNA à transformer
- Pétris pour sélectionner les levures transformées
- LiOAc stérile
- PEG-4000 solution stérile
- ddH2O stérile
Solutions :
LiOAc/LiOAc-PEG 50% (500 ml) : Conc. Finale
LiOAc.2H2O 5.1g 0.1 M
Tris-HCl 1M à pH 8.0 5 ml 10 mM
EDTA 0.5M à pH 8.0 1 ml 1 mM
Compléter à 500 ml ddH2O.
Pour la solution de LiOAc-PEG 50%, garder une partie du lithium acétate pour
dissoudre 25g de PEG-4000 dans un volume final de 50ml (très visqueux).
Stériliser par filtration les 2 solutions.
Aliquoter et garder à ­20 °C.

  

Source: Abou Elela, Sherif - Département de Microbiologie et d'Infectiologie, Université de Sherbrooke

 

Collections: Biology and Medicine