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Summary: Enlever l'ADN mitochondrial des levures
But: Enlever l'ADN mitochondrial des levures.
Matériel:
- culture de levures
- milieu SCD
- Bromure d'éthidium
- Pétris YEPD
Méthode:
1. Faire pousser les levures à saturation dans un milieu SCD (et non YEPD)
contenant 25 µg/ml de Bromure d'éthidium.
2. Inoculer un milieu frais (SCD + EtBr) avec cette culture à une OD600 nm de 0.2
et refaire pousser les levures emcore une fois à saturation.
3. Inoculer plusieurs pétris à différentes densités.
4. Faire pousser à température de croissance de la levure.
On obtiendra ainsi des levures petites (rho-) qui auront perdu leurs
mitochondries. Elles ne pourront plus pousser sur un milieu contenant du
glycérol comme source de carbone.
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