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Summary: 1
Mini-prep d'ADN plasmidique de colonies obtenues suite à une
transformation dans des bactéries
But : Extraction et purification d'une petite quantité d'ADN plasmidique.
Matériel :
- pétris portant les bactéries transformées avec l'ADN à extraire.
- Solutions 1, 2 et 3.
- Lysozyme (50 mg/ml)
- Phénol/chloroforme
- Isopropanol et éthanol
- Éthanol + 2% KoAc.
- ddH2O
- RNAse A pancréatique
Préparation des solutions :
SOLUTION 1 (pour 50 ml) : SOLUTION 3 (pour 50 ml) :
- 2,25 ml de glucose 20% - 30 ml de KoAc 5M à pH 7
- 1,25 ml de Tris 1M à pH 8 - 5,75 ml d'acide acétique glacial
- 1 ml de EDTA 0.5M à pH 8 - 14,25 ml de ddH2O
- 45,5 ml de ddH2O.
Garder à 4 °C. Garder à 4 °C
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